本发明属于家畜基因工程技术领域，涉及一种基于猪CD163 基因的双荧光素酶报告基因

载体的构建及应用。通过对PRRSV 一关键受体基因猪CD163 扩增测序获得该基因3’UTR 区完整片段，预测调控猪CD163 基因3’UTR 区候选microRNAs 和作用靶点，扩增含有作用靶点的猪CD163 基因的序列，将其插入双荧光素酶载体构建猪CD163 基因3’UTR 双荧光素酶报告基因载体psi-CHECK2-CD163-3UTR。该载体可用于检测候选microRNAs 对猪CD163 基因表达的调控活性及用于筛选抑制猪CD163 基因表达的microRNAs 等。